جداسازی وشناسایی مولکولی لاکتوباسیل های موجود در برخی از ماست های بومی و آنالیز خواص آنها توسط روش پروتئومیکس

پایان نامه
چکیده

112 نمونه فرآورده های لبنی از قبیل ماست ، دوغ، شیرخام و آغوز از مناطق بکر استان های کرمانشاه، کردستان، لرستان، ایلام و مرکزی جمع آوری شد. جداسازی باکتری ها بر مبنای روش های استاندارد بین المللی انجام شد. پس از انجام کشت های متوالی بر روی محیط های اختصاصی با کسب کلنی های تیپیک و مشاهده میکروسکوپیک، 93 سویه لاکتوباسیل(سویه منتخب) جدا شد. به منظور شناسایی بیوشیمیایی سویه ها تخمیر 19 قند، همچنین رشد در دمای 15 و 45 درجه سلسیوس و واکنش در برابر اسکولین بررسی شد. سپس براساس قدرت تولید فولات و استالدئید غربالگری انجام و سویه های برتر انتخاب شدند.ژنوم سویه ها با آغازگرهای مخصوص جنس تکثیر شدند و لاکتوباسیل بودن سویه ها تایید شد. همچنین ژن s rrna 16 کامل تکثیر و در باکتری e.coli dh5? کلون شد.توالی نوکلئوتیدی ژن های همسانه سازی شده تعیین و در بانک ژن ncbi ثبت گردید. پس از مقایسه توالی های مذکور با دیگر باکتری های ثبت شده در این بانک، درخت فیلوژنی رسم گردید و مشخص شد که باکتری های تولید کننده فولات به لاکتوباسیلوس کروستوروم شباهت دارند و باکتری های تولید کننده استالدئید به لاکتوباسیلوس فرمنتوم شباهت دارند. سپس از باکتری های برتر، پروتئین استخراج و با الکتروفورز دوبعدی لکه های پروتئینی آنها از هم جدا شدند. سپس لکه های پروتئینی سویه kr43 (با توان تولید استالدئید) توسط طیف سنجی جرمی ms/ms آنالیز شدند.برخی از پروتئین های شناسایی شده معرف مسیر جدیدی برای تولید استالدئید ( از ئیدرولیز استوئین) در این باکتری می باشند. در این بررسی شناسایی و جداسازی لاکتوباسیل ها با تولید اسید فولیک بالا ( بیش از 50 میکروگرم بر لیتر) و لاکتوباسیل های دیگری با توان تولید استالدئید بالا( 20 میلی گرم بر کیلوگرم) و در نهایت معرفی یک مسیر جدید برای تولید استالدئید در لاکتوباسیل ها برای اولین بار صورت گرفته است.

منابع مشابه

جداسازی و شناسایی مولکولی لاکتوباسیل های موجود دربرخی از فرآورده های لبنی بومی

یکصد و دوازده نمونه فراورده های لبنی از قبیل ماست، دوغ و شیرخام از مناطق بکر استان های کرمانشاه، کردستان، لرستان، ایلام و مرکزی جمع آوری شد. جداسازی باکتری ها بر مبنای روش های استاندارد بین المللی انجام شد. پس از انجام کشت های متوالی بر روی محیط های اختصاصی با کسب کلنی های تیپیک و مشاهده میکروسکوپی، نود و سه باکتری برای آنالیزهای بعدی انتخاب شدند. به منظور شناسایی بیوشیمیایی سویه ها تخمیر 19 قن...

متن کامل

بررسی خصلت ضد میکروبی لاکتوباسیل های جداشده از ماست های بومی استان چهار محال و بختیاری علیه باکتری های پاتوژن و مقایسه نتایج با سویه های تجاری پروبیوتیک

 مقدمه وهدف: لاکتوباسیل ها قابلیت مصرف در غذای انسام و دام به عنوان پروبیوتیک دارند و با تولید ترکیبات مختلف مانع از استقرار و رشد باکتری های مضر در روده می شوند. همچنین با بهبود بخشیدن عملکرد سیستم ایمنی بدن باعث افزایش مقاومت مقابل عفونت می شوند.  باکتری های گرم منفی روده ای خصوصاً شیگلا، اشرشیا کلی و سالمونلا، از مهمترین عوامل ایجاد بیماری های ناشی از غذا و اسهال در کشورهای در حال توسعه ...

متن کامل

جداسازی و غربال‌گری باکتری‌های تولید‌کننده اگزوپلی‌ساکارید از محصولات لبنی بومی استان کرمان و شناسایی مولکولی آنها

اگزوپلی‌ساکاریدهای تولیدی توسط باکتری‌های اسید‌لاکتیک در بهبود خواص حسی و بافتی محصولات لبنی تخمیری نقش مهمی ایفا می‌کنند. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری‌های تولید‌کننده اگزوپلی‌ساکارید از محصولات لبنی بومی استان کرمان می‌باشد. نمونه‌های محصولات لبنی سنتی در شرایط استریل جمع‌آوری‌ شده و مستقیماً روی محیط ام.آر.اس آگار کشت داده شد. پس از خالص‌سازی و بررسی خصوصیات میکروسکوپی و ...

متن کامل

تولید اگزوپلی ساکارید از لاکتوباسیل های جداشده از دو محصول لبنی ماست و پنیر سنتی ایران

سابقه و هدف : اگزوپلی ساکاریدهای تولیدی توسط باکتری های اسید لاکتیک در بهبود خواص حسّی و بافتی محصولات شیری تخمیری مثل ماست نقش مهمی ایفا می کنند. از سوی دیگر خواص پروبیوتیکی این باکتریها و ویژگیهای پری بیوتیکی بیوپلیمر های تولیدی آنها سبب ارتقاء سلامت مصرف کننده می شوند. هدف این تحقیق، بررسی میزان تولید اگزوپلی ساکاریدهای باند شده و آزاد در 16 جدایه لاکتوباسیل جدا شده از ماست و پنیر سنتی ایران ...

متن کامل

جداسازی تعدادی از گونه های میکرومونوسپورآ از خاک و شناسایی خواص ضد باکتریایی آنها

زمینه و هدف: جنس میکرومونوسپورآ منبع پرکاربرد متابولیت های مختلف فعال زیستی مانند آنتی بیوتیک ها و مهار کننده های آنزیم است. اعضای میکرومونوسپورآ به طور گسترده در انواع زیستگاه ها، به ویژه خاک غنی توزیع شده اند. مطالعه حاضر با هدف جداسازی، شناسایی ایزوله ها توسط تکثیر ژن 16S rRNA تا سطح جنس و تعیین فعالیت ضد میکروبی آنها صورت پدیرفت. مواد و روش ها: 60نمونه خاک از نقاط مختلف ایران جمع آوری شد...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023